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赫澎(上海)生物科技有限公司
HePeng(Shanghai)Biotech.,Ltd.
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神經(jīng)組織髓鞘(myelin sheath)固藍(lán)(FAST BLUE)染色試劑盒
產(chǎn)品編號(hào) HPBIO-JM4630
中文名稱: 神經(jīng)組織髓鞘(myelin sheath)固藍(lán)(FAST BLUE)染色試劑盒
英文名稱:
品牌: 赫澎生物HEPENGBIO
規(guī)格型號(hào): 50次
髓鞘是白色脂肪、無生命的物質(zhì)存在于神經(jīng)纖維周圍形成一個(gè)絕緣和保護(hù)作用的鞘。臘克沙固藍(lán)(Luxol fast blue),又稱羅克沙爾堅(jiān)牢藍(lán)或溶劑藍(lán)38,深藍(lán)青色粉末。系一種酞菁銅的磺酸二芳基胍鹽(diarylquanidine salt of a sulphonated copper phthalocyanine)。通過酸堿反應(yīng)形成鹽的過程,由脂蛋白的堿性成分取代染料的堿性成分,達(dá)到染色的目的,特異性地針對(duì)含有磷脂的髓鞘質(zhì)。
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A)         毫升(自備)
HEPENGBIO補(bǔ)水液A(Reagent B)  毫升
HEPENGBIO補(bǔ)水液B(Reagent C)  毫升
HEPENGBIO補(bǔ)水液C(Reagent D)  毫升
HEPENGBIO補(bǔ)水液D(Reagent E)  毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent F)  毫升
HEPENGBIO平衡液(Reagent G)  毫升
產(chǎn)品說明書  1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里,避免光照,瓶口密閉;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證3月
 
用戶自備
 
小型玻璃染色缸:用于石蠟切片的脫蠟和染色操作
培養(yǎng)箱:用于切片染色孵育
中性樹脂:用于切片封片
光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
 
 
 
 
實(shí)驗(yàn)步驟
 
一、 脫蠟處理
 
1. 取出10片待測(cè)的10微米厚的石蠟包埋的組織切片(注意:石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時(shí),此步很重要
2. (選擇步驟)放進(jìn)80℃烘箱,孵育30分鐘
3. (選擇步驟)室溫下靜置15分鐘
4. 按下表依次放進(jìn)小染色缸里孵育
染色缸  孵育時(shí)間 
xx毫升HEPENGBIO脫蠟液Reagent A  15分鐘
xx毫升HEPENGBIO脫蠟液Reagent A 15分鐘
xx毫升HEPENGBIO脫蠟液Reagent A 15分鐘
xx毫升HEPENGBIO補(bǔ)水液AReagent B 3分鐘
xx毫升HEPENGBIO補(bǔ)水液BReagent C 3分鐘
xx毫升HEPENGBIO補(bǔ)水液CReagent D 3分鐘
xx毫升HEPENGBIO補(bǔ)水液DReagent E  3分鐘
 
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO補(bǔ)水液DReagent E
6. 小心加上xx微升HEPENGBIO補(bǔ)水液AReagent B在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
7. 小心移去切片上的HEPENGBIO補(bǔ)水液AReagent B
二、 樣本染色處理
1. 準(zhǔn)備1個(gè)50或100毫升小型染色缸
2. 加入適量的HEPENGBIO染色液(Reagent F到小型染色缸里
3. 小心放進(jìn)上述脫蠟處理的切片(注意:確保切片浸泡在HEPENGBIO染色液(Reagent F
4. 置于60℃培養(yǎng)箱里孵育16小時(shí),避免光照(注意:參見注意事項(xiàng)89
5. 取出切片,小心移去切片上的HEPENGBIO染色液(Reagent F
6. 室溫下,小心將切片置入新的xx毫升HEPENGBIO補(bǔ)水液AReagent B中5次(2秒/次) 
7. 輕輕移去切片上的HEPENGBIO補(bǔ)水液AReagent B),或空氣中晾干 
8. 小心加上xx微升HEPENGBIO補(bǔ)水液DReagent E
9. 小心移去切片上的HEPENGBIO補(bǔ)水液DReagent E
10. 小心加上xx微升HEPENGBIO平衡液(Reagent G
11. 室溫下孵育30秒
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO平衡液(Reagent G
13. 小心加上xx微升HEPENGBIO補(bǔ)水液BReagent C
14. 室溫下孵育30秒
15. 小心移去切片上的HEPENGBIO補(bǔ)水液BReagent C
16. 小心加上xx微升HEPENGBIO補(bǔ)水液DReagent E
17. 小心移去切片上的HEPENGBIO補(bǔ)水液DReagent E
18. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟13至17,直至可見藍(lán)色(白質(zhì))和灰色(灰質(zhì))的對(duì)比差異
19. (選擇步驟)進(jìn)行復(fù)染操作(建議使用HEPENGBIO甲苯酚紫(CRESYL VIOLET)復(fù)染試劑盒-HEPENGBIO80052)
20. 放上蓋玻片或封片(中性樹脂)
21. 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察:
神經(jīng)髓鞘質(zhì)或髓鞘質(zhì)包裹的神經(jīng)纖維呈現(xiàn)藍(lán)色/綠色,
如果復(fù)染,神經(jīng)元呈現(xiàn)粉紅色或紫色
 
注意事項(xiàng)
 
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時(shí),須戴手套
3. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
4. 建議使用玻璃染色缸
5. 石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時(shí),否則造成樣品支離破碎
6. 每次更換試劑溶液時(shí),保持切片面基本晾干
7. 試劑溶液在切片表面時(shí),避免有氣泡存在,同時(shí)確保鋪滿切片表面
8. HEPENGBIO染色液(Reagent F)避免光照
9. 染色時(shí),染色缸須密閉,至關(guān)重要
10. 染色完成后,即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察 
11. 樣品染色后保存,避免光照
12. 本公司提供系列組織細(xì)胞神經(jīng)系統(tǒng)成分染色試劑產(chǎn)品
檢測(cè)報(bào)告(COA)
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