二價鐵(ferrous)是氧化數(shù)為二的鐵。二價鐵溶解性好,生物學效價優(yōu)于三價鐵,因此鐵首先應被還原為二價鐵,才容易被生物體吸收利用。動物和人體的整個消化道都可以吸收,植物在根尖處吸收。機體大約有三分之二的鐵存在于紅細胞的血紅蛋白和肌肉的肌紅蛋白中,20%的鐵以不同形式存在于肝、脾和其他組織中。鐵作為氧的載體,保證組織內氧的正常輸送,在細胞生物氧化和能量代謝過程中發(fā)揮著重要作用。 通過酸性氰正鐵酸鹽(ferricyanide)與組織中二價正鐵離子(ferrous ion)結合,成為鐵氰亞鐵(ferrous ferricyanide),而呈現(xiàn)不溶性亮藍色色素,又稱為特恩布爾藍或騰氏藍(turnbull blue)。其反應原理如下:
產品內容
HEPENGBIO去石蠟液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO補水液A(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO補水液B(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO補水液C(Reagent D) 毫升
HEPENGBIO補水液D(Reagent E) 毫升
HEPENGBIO清理液(Reagent F) 毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent G) 毫升
HEPENGBIO酸性液(Reagent H) 毫升
HEPENGBIO飽和液(Reagent I) 毫升
產品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO染色液(Reagent G),避免光照;HEPENGBIO染色液(Reagent G)和HEPENGBIO酸性液(Reagent H)具有腐蝕性和毒性,注意操作安全;有效保證6月
用戶自備
2毫升離心管:用于染色工作液配制的容器
核固紅復染試劑盒(HEPENGBIO40011):用于常規(guī)染色后復染
小型染色缸:用于石蠟切片的去石蠟和染色操作
光學顯微鏡:用于組織細胞染色后觀察分析
實驗步驟
一、 去石蠟處理
1. 取出10片待測的石蠟包埋的5微米厚的組織切片(注意:石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,此步很重要)
2. 放進80℃烘箱,孵育30分鐘
3. 室溫下靜置15分鐘
4. 按下表依次放進小染色缸里孵育
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
6. 小心加上x微升HEPENGBIO清理液(Reagent F)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
7. 室溫下孵育5分鐘
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent F)
二、 樣本染色處理
操作開始前,將4℃冰箱里的試劑盒中的HEPENGBIO染色液(Reagent G)和HEPENGBIO酸性液(Reagent H)置于室溫下,分別移出1毫升到2.2毫升離心管,混勻后,標記為HEPENGBIO染色工作液,用錫箔紙包裹,避免光照。然后進行下列操作。
1. 小心加上xx微升HEPENGBIO染色工作液,鋪滿整個切片樣品表面
2. 室溫下孵育60分鐘;或直至可見籃色
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO染色工作液
4. 小心加上xx微升HEPENGBIO飽和液(Reagent I),清洗樣品表面
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO飽和液(Reagent I)
三、 樣本復染處理
1. (選擇步驟)樣本復染處理(核固紅)
2. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液B(Reagent C)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液B(Reagent C)
4. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液A(Reagent B)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液A(Reagent B)
6. 小心加上xx微升HEPENGBIO去石蠟液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
7. 小心移去切片上的HEPENGBIO去石蠟液(Reagent A)
8. 放上蓋玻片或封片
9. 即刻在一般光學顯微鏡下觀察:二價鐵沉積陽性細胞呈現(xiàn)亮藍色(如果復染:細胞質呈現(xiàn)粉紅色,細胞核呈現(xiàn)紅色)
產品內容
HEPENGBIO去石蠟液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO補水液A(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO補水液B(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO補水液C(Reagent D) 毫升
HEPENGBIO補水液D(Reagent E) 毫升
HEPENGBIO清理液(Reagent F) 毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent G) 毫升
HEPENGBIO酸性液(Reagent H) 毫升
HEPENGBIO飽和液(Reagent I) 毫升
產品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO染色液(Reagent G),避免光照;HEPENGBIO染色液(Reagent G)和HEPENGBIO酸性液(Reagent H)具有腐蝕性和毒性,注意操作安全;有效保證6月
用戶自備
2毫升離心管:用于染色工作液配制的容器
核固紅復染試劑盒(HEPENGBIO40011):用于常規(guī)染色后復染
小型染色缸:用于石蠟切片的去石蠟和染色操作
光學顯微鏡:用于組織細胞染色后觀察分析
實驗步驟
一、 去石蠟處理
1. 取出10片待測的石蠟包埋的5微米厚的組織切片(注意:石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,此步很重要)
2. 放進80℃烘箱,孵育30分鐘
3. 室溫下靜置15分鐘
4. 按下表依次放進小染色缸里孵育
染色缸 | 孵育時間 |
xx毫升HEPENGBIO去石蠟液(Reagent A) | 15分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO去石蠟液(Reagent A) | 15分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO去石蠟液(Reagent A) | 15分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO補水液A(Reagent B) | 3分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO補水液B(Reagent C) | 3分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO補水液C(Reagent D) | 3分鐘 |
xx毫升HEPENGBIO補水液D(Reagent E) | 3分鐘 |
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液D(Reagent E)
6. 小心加上x微升HEPENGBIO清理液(Reagent F)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
7. 室溫下孵育5分鐘
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent F)
二、 樣本染色處理
操作開始前,將4℃冰箱里的試劑盒中的HEPENGBIO染色液(Reagent G)和HEPENGBIO酸性液(Reagent H)置于室溫下,分別移出1毫升到2.2毫升離心管,混勻后,標記為HEPENGBIO染色工作液,用錫箔紙包裹,避免光照。然后進行下列操作。
1. 小心加上xx微升HEPENGBIO染色工作液,鋪滿整個切片樣品表面
2. 室溫下孵育60分鐘;或直至可見籃色
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO染色工作液
4. 小心加上xx微升HEPENGBIO飽和液(Reagent I),清洗樣品表面
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO飽和液(Reagent I)
三、 樣本復染處理
1. (選擇步驟)樣本復染處理(核固紅)
2. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液B(Reagent C)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液B(Reagent C)
4. 小心加上xx微升HEPENGBIO補水液A(Reagent B)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO補水液A(Reagent B)
6. 小心加上xx微升HEPENGBIO去石蠟液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
7. 小心移去切片上的HEPENGBIO去石蠟液(Reagent A)
8. 放上蓋玻片或封片
9. 即刻在一般光學顯微鏡下觀察:二價鐵沉積陽性細胞呈現(xiàn)亮藍色(如果復染:細胞質呈現(xiàn)粉紅色,細胞核呈現(xiàn)紅色)