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赫澎(上海)生物科技有限公司
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石蠟切片軟骨組織阿爾新藍(lán)(alcian blue)染色試劑盒
產(chǎn)品編號 HPBIO-JM10651
中文名稱: 石蠟切片軟骨組織阿爾新藍(lán)(alcian blue)染色試劑盒
英文名稱:
間質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell)分化產(chǎn)生脂肪細(xì)胞(adipocyte)、成骨細(xì)胞(osteoblast)、肌細(xì)胞(myocyte和軟骨細(xì)胞(chondrocyte)。軟骨細(xì)胞及其細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix)構(gòu)成軟骨組織(cartilage tissue),其含有硫酸軟骨素(chondroitin sulfate)和硫酸角質(zhì)素(karatan sulfate)等為主要成分的蛋白多糖(proteoglycan)聚糖(aggrecan),成為軟骨生成(chondrogenesis)的標(biāo)記(indicator)。甲苯胺藍(lán)(toluidine blue)是一種異染性(metachromatic)陽離子堿性染料,使軟骨組織細(xì)胞中的酸性蛋白聚糖(proteoglycan)染色,呈現(xiàn)紫藍(lán)色。
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
HEPENGBIO脫蠟液(Reagent A)         300毫升(自備)
HEPENGBIO補(bǔ)水液A(Reagent B)  XX毫升
HEPENGBIO補(bǔ)水液B(Reagent C)  XX毫升
HEPENGBIO補(bǔ)水液C(Reagent D)  XX毫升
HEPENGBIO補(bǔ)水液D(Reagent E)  XX毫升
HEPENGBIO清理液(Reagent F)  XX毫升
HEPENGBIO酸性液(Reagent G)  XX毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent H)  XX毫升
產(chǎn)品說明書    1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO染色液(Reagent H),避免光照;試劑具有腐蝕性,注意操作安全。有效保證3月
 
用戶自備
 
小型染色缸:用于石蠟切片的脫蠟操作
光學(xué)顯微鏡:用于組織細(xì)胞染色后觀察分析
 
實驗步驟
 
一、 蠟處理
 
1. 取出10片待測的石蠟包埋的組織切片(注意:石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,此步很重要
2. (選擇步驟)放進(jìn)80℃烘箱,孵育30分鐘
3. (選擇步驟)室溫下靜置15分鐘
4. 按下表依次放進(jìn)小染色缸里孵育
 
染色缸  孵育時間 
XX毫升HEPENGBIO蠟液Reagent A  XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO蠟液Reagent A XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO蠟液Reagent A XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO補(bǔ)水液AReagent B XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO補(bǔ)水液BReagent C XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO補(bǔ)水液CReagent D XX分鐘
XX毫升HEPENGBIO補(bǔ)水液DReagent E  XX分鐘
 
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO補(bǔ)水液DReagent E
6. 小心加上XX微升HEPENGBIO清理液(Reagent F在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
7. 室溫下孵育5分鐘
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent F
二、樣本染色處理
1. 小心加上XX微升HEPENGBIO酸性液(Reagent G,鋪滿整個切片樣品表面
2. 室溫下孵育15秒
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO酸性液(Reagent G
4. 小心加上XX微升HEPENGBIO染色液(Reagent H,鋪滿整個切片樣品表面
5. 室溫下,孵育5分鐘,避免光照
6. 小心移去切片上的HEPENGBIO染色液(Reagent H
7. 室溫下,小心將切片置入XX毫升HEPENGBIO清理液(Reagent F中孵育2分鐘
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent F
 
 
 
三、 (選擇步驟)樣本復(fù)染處理
 
1. 樣本復(fù)染處理(固綠)
2. 放上蓋玻片或封片(注意:避免使用水相封片液)
3. 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察:陽性組織細(xì)胞呈現(xiàn)紫藍(lán)色,細(xì)胞核呈現(xiàn)深藍(lán)色(如果復(fù)染:背景呈現(xiàn)淺綠色調(diào))
 
注意事項
 
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時,須帶手套
3. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
4. 石蠟包埋前,組織樣品須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,否則造成樣品支離破碎
5. 所有操作在室溫下進(jìn)行
6. 用戶可以使用二甲苯替代HEPENGBIO蠟液(Reagent A)
7. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面
8. 建議使用HEPENGBIO固綠復(fù)染試劑盒( ),增強(qiáng)染色對比度
9. 組織細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察 
檢測報告(COA)
使用說明
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